Molekularna diagnoza, za kaj gre, čemu služi in kako to počne
Molekularna diagnoza ustreza množici molekulskih tehnik, katerih namen je prepoznati spremembe v DNK, ki bi lahko na primer kazale na genetske bolezni ali raka. Poleg tega se molekularne tehnike široko uporabljajo za prepoznavanje in potrditev nalezljivih bolezni, saj predstavljajo hitrejšo in natančnejšo diagnostično metodo.
Molekularna diagnoza je draga, zato je zdravniki ne zahtevajo zelo pogosto, kljub temu pa daje natančne rezultate glede prisotnosti spremembe, načina, kako lahko moti delovanje organizma in bolnikov odziv na zdravljenje.
Za kaj gre
Molekularno diagnozo lahko izvedemo z več cilji, med katerimi so glavni:
- Identifikacija mutacij, povezanih s levkemija, kot je identifikacija translokacije BCR-ABL, ki je značilna za kronično mieloidno levkemijo (CML);
- Značilne mutacije hematološke bolezni, kot so dedna hemokromatoza, policitemija vera, esencialna trombocitemija in trombofilija, na primer.
- Molekularne spremembe, ki kažejo na pojav raka, kot so na primer kolorektalni, pljučni, prsni in možganski rak;
- Diagnoza nalezljive bolezni, kot so hepatitis, uretritis, toksoplazmoza, lešmanijoza itd HPV virus.
Molekularna diagnoza je, čeprav se v primerjavi z drugimi diagnostičnimi tehnikami zdi draga, natančnejša, saj lahko sporoči spremembe, povezane z določeno boleznijo, in stopnjo vpliva te spremembe v telesu ter tako pomaga pri zdravljenju osebe..
Poleg tega, da se uporabljajo za diagnozo številnih bolezni, se molekularne tehnike uporabljajo tudi za oceno odziva na zdravljenje, zlasti pri ljudeh z rakom, ki so ena izmed najučinkovitejših metod za prikaz napredovanja in ponovitve bolezni..
Kako se to počne
Molekularno diagnozo lahko opravimo s katerim koli vzorcem, ki ga na zahtevo zdravnika zahteva tisti, ki lahko najbolje poda podatke o bolnikovem stanju, to so lahko urin, slina ali v večini primerov kri. Post ali katera koli druga priprava za izpit ni potrebna.
Vzorec se odvzame in pošlje v laboratorij skupaj z navodili zdravnika, ki sporočajo izpit ali vrsto raziskave, ki jo je treba opraviti. Izvedena molekularna tehnika je odvisna od zahtevanega izpita in vključuje vrsto natančnih postopkov, katerih namen je ugotoviti prisotnost ali odsotnost spremembe, ki jo zahteva zdravnik.
Običajno se uporabi le majhna količina poslanega vzorca, preostali del se shrani tako, da se po potrebi izpit ponovi.
Poglejte, katere so glavne molekularne tehnike
PCR
A PCR, kratko za verižno reakcijo polimeraze ali Verižna reakcija polimeraze, je molekularna tehnika, ki sestoji iz množenja fragmenta genskega materiala, bodisi DNK ali RNK, z namenom prepoznavanja mutacij in s tem pomoči pri diagnozi bolezni.
Ta tehnika je narejena iz ekstrakcije in čiščenja genskega materiala, ki ga nato damo v mešanico, v kateri je ena od komponent restrikcijski encim, ki se spreminja glede na zahtevani pregled in katerega naloga je razrez materiala na drobce tako da je mogoče ugotoviti možno gensko spremembo. Mešanico damo v termocikler, ki je naprava, ki deluje zaradi temperaturnih nihanj, ki jih strokovnjak glede na izpit navaja in s tem omogoča ojačanje genetskega fragmenta. V primeru običajnega PCR se po amplifikaciji izdelku PCR podvrže elektroforeza, ki je molekularna tehnika, ki temelji na teži in velikosti fragmentov, torej se glede na te značilnosti ustvari pasni vzorec, katerega analiza je narejena na podlagi pozitivnega kontrolnega pasu, to je pasu, ki je znan kar ustreza genskim spremembam.
A PCR v realnem času, imenovan tudi qPCR, gre za vrsto kvantitativnega PCR, torej je poleg identifikacije genske spremembe sposoben zagotoviti podatke o ekspresiji genov, torej o tem, koliko spremenjenega gena se v organizmu izrazi, torej lahko uporablja se za pomoč pri diagnozi in spremljanju zdravljenja. PCR v realnem času ne potrebuje elektroforeze, celoten postopek amplifikacije in analize genetskega materiala opravi naprava, rezultat pa razlaga usposobljeni zdravstveni delavec.
Zaporedje
The zaporedje je molekularna tehnika, ki sestoji iz določanja zaporedja nukleotidov DNK, ki so tvorilne enote genskega materiala. Sekvenciranje nastane iz reakcije, podobne PCR, vendar se v amplifikacijski mešanici dodajo spremenjeni nukleotidi z dodatkom fluorohromov, ki kot material amplificirajo spremenjene nukleotide vgradijo v DNK in ustvarijo več fragmentov, ki ustrezajo zaporednemu izdelku.
Produkt reakcije damo v napravo, imenovano sekvence DNA, v kateri se, ko fragmente dosežemo z laserjem opreme, fluokrokromi vzbudijo, ki oddajajo fluorescenco, kar oprema označuje s konicami, pri čemer vsak vrh ustreza do nukleotida. Na koncu reakcije bo naprava obvestila zaporedje DNK in tako zdravniku pomagala pri diagnozi genetskih bolezni..
